1. 收集臨床病人的卵泡液；

2. 用40um的細(xì)胞篩過(guò)濾卵泡液；

3. 1000rpm/10min，室溫離心，棄上清；

4. 1ml PBS重懸；

5. 將重懸液小心加入到2ml 50%的percoll液面上；

6. 2500rpm/25min，室溫離心；

7. 溶液分為三層：無(wú)色上清液、中間的白色膜狀細(xì)胞層、下層的紅細(xì)胞層；

8. 吸取中間漂浮的白色膜狀細(xì)胞層；

9. 用1ml PBS重懸白色膜狀細(xì)胞層，吹打混勻；

10. 1500rpm/10min，室溫離心，沉淀用DMEM/F12完全培養(yǎng)基重懸；

11. 將收集的顆粒細(xì)胞，用DMEM/F12完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。

12. 代表性結(jié)果。