細胞免疫熒光主要用于蛋白定位研究和細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導，細胞免疫熒光技術是利用免疫技術和熒光標記技術相結合，原理就是利用抗原-抗體反應之后，采用熒光標記，標記完成后，顯微鏡下觀察細胞內(nèi)某種抗原成分的多少，從而做出一個定位研究，也可以為細胞內(nèi)信號傳導提供一個明確的指導，細胞免疫熒光具有敏感性強、特異性高、速度快的特點，是目前比較常用的組織學技術，也是比較精確的。
　　細胞免疫熒光實驗步驟：
　　首日：
　　1.在培養(yǎng)板中將已爬好細胞的玻片用PBS浸洗3次，每次3min；
　　2.用4%的多聚甲醛固定爬片15min，PBS浸洗玻片3次，每次3min；
　　3.0.5%TritonX-100(PBS配制)室溫通透20min（細胞膜上表達的抗原省略此步驟）；
　　4.PBS浸洗玻片3次，每次3min，吸水紙吸干PBS，在玻片上滴加正常山羊血清，室溫封閉30min；
　　5.吸水紙吸掉封閉液，不洗，每張玻片滴加足夠量的稀釋好的一抗并放入濕盒，4℃孵育過夜；
　　次日：
　　6.加熒光二抗：PBST浸洗爬片3次，每次3min，吸水紙吸干爬片上多余液體后滴加稀釋好的熒光二抗，濕盒中20-37℃孵育1h，PBST浸洗切片3次，每次3min；注意：從加熒光二抗起，后面所有操作步驟都盡量在較暗處進行。
　　7.復染核：滴加DAPI避光孵育5min，對標本進行染核，PBST5minx4次洗去多余的DAPI；8.用吸水紙吸干爬片上的液體，用含抗熒光淬滅劑的封片液封片，然后在熒光顯微鏡下觀察采集圖像。