15221734409
當(dāng)前位置：首頁 > 實(shí)驗(yàn)服務(wù) > 分子檢測實(shí)驗(yàn) > DTA負(fù)篩選基因?qū)嶒?yàn)
簡要描述：DTA負(fù)篩選基因?qū)嶒?yàn)：DTA（Diphtheria Toxin A）負(fù)篩選基因是一種常用的遺傳工程工具，主要用于剔除未發(fā)生特定重組事件的細(xì)胞。這種技術(shù)依賴于白喉毒素A鏈（DTA），它能抑制蛋白質(zhì)合成并導(dǎo)致細(xì)胞死亡。在基因打靶實(shí)驗(yàn)中，DTA通常被用來作為負(fù)篩選標(biāo)記，以確保只有那些經(jīng)歷了正確同源重組的細(xì)胞才能存活下來。
更新時(shí)間：2025-07-24 16:14:25
訪 問 量：326
服務(wù)分類
相關(guān)文章
Related Articles詳細(xì)介紹
DTA負(fù)篩選基因?qū)嶒?yàn)
DTA（Diphtheria Toxin A）負(fù)篩選基因是一種常用的遺傳工程工具，主要用于剔除未發(fā)生特定重組事件的細(xì)胞。這種技術(shù)依賴于白喉毒素A鏈（DTA），它能抑制蛋白質(zhì)合成并導(dǎo)致細(xì)胞死亡。在基因打靶實(shí)驗(yàn)中，DTA通常被用來作為負(fù)篩選標(biāo)記，以確保只有那些經(jīng)歷了正確同源重組的細(xì)胞才能存活下來。
作用機(jī)制：DTA編碼的是白喉毒素的一個(gè)亞單位，該毒素能夠阻斷真核生物中的蛋白質(zhì)合成過程。當(dāng)DTA表達(dá)時(shí)，它可以殺死含有它的細(xì)胞，除非這些細(xì)胞具備抵抗此毒性的能力。
應(yīng)用背景：在構(gòu)建轉(zhuǎn)基因動(dòng)物或細(xì)胞系的過程中，研究人員常常需要篩選出發(fā)生了精確DNA整合的細(xì)胞。為了做到這一點(diǎn)，除了使用正篩選標(biāo)記如neo等來選擇成功導(dǎo)入外源DNA的細(xì)胞之外，還會(huì)利用到DTA這樣的負(fù)篩選標(biāo)記來淘汰那些沒有正確整合目標(biāo)DNA的細(xì)胞。
在CRISPR-Cas9介導(dǎo)的全基因組敲除文庫篩選中，DTA可以與TK（胸苷酸激酶）一起用作報(bào)告系統(tǒng)的一部分，幫助識(shí)別參與天然免疫信號(hào)通路調(diào)控的關(guān)鍵宿主基因。
通過將DTA置于特定啟動(dòng)子控制之下，比如IFNβ啟動(dòng)子區(qū)域的最佳截短版本，可以在病毒感染后誘導(dǎo)EGFP或者zi殺基因TK和DTA的表達(dá)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)相關(guān)基因的功能性篩選。
提高特異性：由于DTA能夠有效清除不希望出現(xiàn)的隨機(jī)整合事件，因此它有助于增加最終獲得的目標(biāo)克隆群體中的正確重組體比例。
增強(qiáng)效率：結(jié)合其他篩選方法（例如G418抗性篩選），DTA負(fù)篩選可以幫助快速縮小候選細(xì)胞株范圍，減少后續(xù)分析所需的工作量。
DTA負(fù)篩選基因?qū)嶒?yàn)
產(chǎn)品咨詢
掃碼關(guān)注
郵箱：yilaibo@shyilaibo.com
地址：上海市寶山區(qū)長江南路180號(hào)長江軟件園B650
歡迎來到